復旦大學發(fā)文：關于肝癌免疫治療的新見解
10月18日，復旦大學研究團隊在期刊《Advanced Science》上發(fā)表了研究論文，題為“Increased PRP19 in Hepatocyte Impedes B Cell Function to Promote Hepatocarcinogenesis”，本研究中，研究人員對高和低B細胞浸潤的HCC樣本的表達差異進行了探索，以識別關鍵調節(jié)因子。研究發(fā)現(xiàn)，抑制PRP19表達促進了腫瘤組織中B細胞浸潤，并阻礙了HCC的生長。機制上，共免疫沉淀（Co-IP）實驗揭示，PRP19與DDX5相互作用，導致DDX5蛋白的泛素化和降解。減弱的DDX5會破壞CXCL12 mRNA的穩(wěn)定性，通過CXCL12/CXCR4軸抑制B細胞招募和漿細胞分化。此外，在小鼠模型中，采用CXCR4+ B細胞的過繼轉移結合CXCL12治療有效地抑制了HCC的發(fā)生，從而重塑了免疫反應。PRP19、DDX5和浸潤B細胞的表達被認為是HCC患者的臨床預后指標?？偟膩碚f，這項研究為HCC免疫治療提供了有價值的見解，通過靶向PRP19并調節(jié)腫瘤浸潤B細胞的免疫功能來改善臨床療效。
背景信息
肝細胞癌（HCC）是肝癌常見的類型，仍然是全球范圍內的健康挑戰(zhàn)。大多數(shù)HCC病例通常發(fā)生在炎癥的肝臟、炎癥狀態(tài)和腫瘤微環(huán)境中的免疫反應，這可以顯著影響惡性腫瘤的生物學行為。早期對免疫療法的研究發(fā)現(xiàn)，由免疫細胞調節(jié)的抗腫瘤反應可以作為治療實體或血液腫瘤的有效工具，尤其是對T細胞和巨噬細胞。在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤浸潤的B細胞是適應性免疫系統(tǒng)的關鍵組成部分，具有顯著的功能多樣性，包括抗原呈遞細胞（APC）、細胞因子產生細胞和分泌抗體的漿細胞等不同亞群。進一步研究腫瘤微環(huán)境中的B細胞可能為調節(jié)免疫反應和對HCC進行有意義的治療干預提供重要方法。
腫瘤浸潤性B細胞的功能特征及其對腫瘤免疫的影響仍存在爭議。在人類惡性腫瘤中，B細胞高度異質性，表現(xiàn)出不同的促腫瘤和抗腫瘤作用。早期研究報道CD20+ B細胞具有抗腫瘤特性；然而，調節(jié)性B細胞（Bregs）通過上調IL-10和TGF-β主要驅動腫瘤進展。在結直腸腫瘤中，研究人員發(fā)現(xiàn)了一種由亮氨酸代謝誘導的特殊B細胞亞群，即LARS B細胞，通過抑制B細胞線粒體NAD+再生和氧化代謝促進腫瘤免疫逃避。到目前為止，調節(jié)B細胞浸潤和功能以促進腫瘤發(fā)展的關鍵因素尚未闡明。PRP19是PRP19相關復合物的關鍵成員，具有多種生物學功能，如DNA損傷響應、腫瘤放療抵抗和蛋白質泛素化。然而，PRP19表達與HCC腫瘤微環(huán)境中B細胞功能之間的關系尚不清楚。
PRP19缺乏通過促進B細胞浸潤抑制HCC進展
為了深入了解PRP19在肝癌發(fā)生過程中B細胞功能中的作用，研究人員在體外建立了PRP19敲除小鼠肝癌細胞，并將對照組和PRP19敲除HCC細胞通過皮下注射注入小鼠體內。令人驚訝的是，研究人員觀察到PRP19敲除組小鼠腫瘤體積更小，腫瘤生長速度更慢。流式細胞術顯示PRP19敲除小鼠肝癌組織中B細胞水平更高。CD4+T、CD8+T和CD115+單核細胞在對照組和PRP19敲除組之間沒有顯著差異。PRP19免疫組織化學染色和B細胞標記CD20的免疫組化染色支持流式細胞術的結果。
PRP19缺乏促進B細胞浸潤，抑制肝癌的進展
為了研究PRP19在調節(jié)B細胞遷移方面的作用，研究人員收集了外周血單個核細胞（PBMCs），并在體外與HCC細胞共培養(yǎng)。研究人員采用流式細胞術（FCM）研究招募的CD19+ B細胞比例。結果表明，與PRP19過表達的HCC細胞共培養(yǎng)時，B細胞的遷移傾向較差。然而，與PRP19敲除共培養(yǎng)組相比，招募的B細胞比例有所增加。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)HCC細胞中PRP19表達的變化對T細胞的遷移能力沒有影響。進一步在3D HCC球體中測量B細胞遷移能力，發(fā)現(xiàn)PRP19敲除HCC球體中B細胞的滲透率較高。接下來，研究人員探索了B細胞在HCC進展中的作用。首先，研究人員使用抗CD20抗體刪除小鼠B細胞，并通過FCM確認了刪除效果。此外，在B細胞刪除和野生型小鼠中，使用對照和PRP19敲除Hepa1-6細胞構建了原位肝腫瘤模型。研究人員發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，PRP19敲除抑制了小鼠HCC的發(fā)展。然而，B細胞的缺失削弱了PRP19敲除對小鼠肝癌發(fā)展的抗腫瘤作用。這些發(fā)現(xiàn)表明，在肝癌細胞中抑制PRP19可能會誘導B細胞浸潤，阻礙肝細胞癌的發(fā)生，而B細胞的缺失會削弱PRP19抑制的腫瘤抑制作用。
HCC組織中PRP19、DDX5和CD20+B細胞水平相關，并可作為HCC患者的預后指標
研究人員測量了120例來自中山醫(yī)院的HCC樣本中PRP19和DDX5的表達以及CD20+B細胞的浸潤情況。根據H-評分，研究人員將HCC患者分為PRP19低表達、中等表達和高表達三組。PRP19低表達組患者的DDX5表達和CD20+B細胞浸潤較高。然而，高PRP19表達的HCC患者的DDX5表達和CD20+B細胞浸潤較低。相關性分析表明，PRP19在HCC患者中與DDX5表達呈負相關，而DDX5與CD20水平呈正相關。Kaplan-Meier生存分析顯示，HCC患者中PRP19高表達預示總體生存率低和腫瘤復發(fā)率高。相反，DDX5水平低的患者術后臨床預后不佳，復發(fā)率高，這與之前的研究一致。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)PRP19和DDX5水平高的患者在四個組中預后較差。綜合數(shù)據表明，PRP19通過調節(jié)DDX5和CXCL12的水平，在B細胞免疫功能障礙中發(fā)揮著關鍵作用，并且與HCC的不良預后存在臨床相關性。
結論
總之，本研究揭示了PRP19表達與HCC發(fā)生過程中B細胞功能之間的聯(lián)系。通過DDX5介導的CXCL12-CXCR4軸，PRP19抑制促進B細胞招募以抑制HCC腫瘤發(fā)生。此外，研究人員闡明了在小鼠模型中，通過重塑TME，將CXCR4+B細胞的過繼轉移與CXCL12治療相結合，可以有效抑制HCC發(fā)生。因此，本研究為通過靶向PRP19并調節(jié)B細胞免疫功能來治療HCC提供了理論依據。
聲明：本文版權歸原作者所有，轉載文章僅為傳播更多信息，如作者信息標記有誤，或侵犯您的版權，請聯(lián)系我們，我們將在及時修改或刪除內容，聯(lián)系郵箱：marketing@360worldcare.com
